本发明属于葡萄糖和蔗糖在线检测技术领域，涉及一种同时检测蔗糖和葡萄糖双组分溶液浓度的方法。采用由蔗糖酶电极、葡萄糖酶电极、参比电极、对电极、检测池1、检测池2和信号采集计算系统构成的生物传感器进行检测；本发明提供的用于蔗糖和葡萄糖双组分溶液检测的酶生物传感器具备制备方法简单、成本低的优点；该酶生物传感器在实现葡萄糖和蔗糖同时检测的前提下，能够消除葡萄糖对蔗糖检测结果的干扰，提高检测结果的准确性。适用于食品、医药分析及其发酵工程中葡萄糖以及蔗糖的检测，实用性强。