一株分泌烟酸单克隆抗体杂交瘤细胞株及其应用，属于食品免疫检测技术领域。杂交瘤细胞株的保藏编号为：CGMCC No.45011。本发明先合成免疫原烟酸‑KLH，再使用弗氏佐剂混合乳化，注射免疫BALB/c小鼠。筛选出高效价，低IC50的小鼠脾细胞，通过PEG方法与小鼠骨髓瘤细胞融合，选择性培养基，筛选出两种细胞融合后的杂交瘤细胞；再经过间接竞争酶联免疫法筛选细胞并三次亚克隆，最终得到分泌烟酸单克隆抗体杂交瘤细胞株。此细胞株分泌的单克隆抗体，对烟酸具有较好的检测灵敏度，可用于制备烟酸的免疫检测试剂盒以及胶体金试纸条，用于食品中烟酸的检测。