本发明涉及一种检测新型冠状病毒感染性的寡核苷酸,以及含有该寡核苷酸的试剂盒及应用，属于生物技术领域。本发明的试剂盒，包括以下组分：（1）叠氮溴化丙锭（PMA）溶液；（2）磷酸盐缓冲盐溶液（PBS，PH=7.4）；（3）RNA提取试剂；（4）扩增反应液，包括One Step PrimeScript III RT‑qPCR Mix、上下游引物和Taqman探针；（5）阳性质控品；为灭活的新型冠状病毒或假病毒；（6）阴性对照，灭菌去离子水。本发明具有检测灵敏度高、检测时间短、操作步骤简单、应用范围广等特性，且在生物安全二级（BSL‑2）实验室即可开展，具有广阔的应用前景。