本发明公开了一种分泌抗氨氯吡啶酸单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用，属于食品安全免疫检测领域。本发明分泌抗氨氯吡啶酸单克隆抗体的杂交瘤细胞株，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号CGMCC No.20794。本发明获得的抗氨氯吡啶酸单克隆抗体细胞株可用于免疫分析检测，其对氨氯吡啶酸有较好的检测灵敏度和特异性(IC50值为50ng/mL)。本发明成果可用制备氨氯吡啶酸的免疫检测试剂盒以及胶体金试纸条，为谷物、油料、蔬菜、糖料、烟草中氨氯吡啶酸残留量的检测提供有力的检测方法与手段。