本发明公开了利用预处理棉籽粕固态发酵制备凝结芽孢杆菌的方法，属于发酵工程技术领域。本发明公开一种利用预处理棉籽粕固态发酵制备凝结芽孢杆菌的方法，包括菌种多级驯化、棉籽粕预处理以及固体浅盘发酵；其中，所述棉籽粕预处理是将棉籽粕与水混合，调节pH后，添加复合酶和无机盐，得到预处理棉籽粕；所述固体浅盘发酵，是向所述预处理棉籽粕中接种经过多级驯化的凝结芽孢杆菌，固体发酵培养，得到凝结芽孢杆菌发酵物，干燥后得到成品。本发明利用预处理棉籽粕固体发酵凝结芽孢杆菌，可以大幅度提高凝结芽孢杆菌的发酵菌数，实现了凝结芽孢杆菌的高密度发酵，扩展了棉籽粕资源的利用途径，提升了资源的利用效率。