本发明公开了一种纤维素一锅法直接制备烷基糖苷表面活性剂的方法：将纤维素和脂肪醇混合，依次加入去离子水和酸性复合相转移催化剂，所述酸性复合相转移催化剂为水合十二磷钨酸和十二烷基苯磺酸的混合物，反应分为两个控制阶段，反应结束冷却至80℃以下，过滤，收集滤液，加入氢氧化钠溶液中和至溶液pH为7～9为止，加入蒸馏脱醇装置，抽真空至残压小于10mmHg，升温至130～180℃，保持至气相温度小于40℃结束，获得所述烷基糖苷表面活性剂。本发明利用自然界广泛存在的纤维素代替葡萄糖与中长链脂肪醇直接反应，一锅法制备烷基糖苷表面活性剂，拓展了纤维素的应用范围，所用的原料纤维素在自然界中广泛存在。