一种检测血管紧张素转换酶的方法及其应用
摘要:
本发明公开了一种检测血管紧张素转换酶的方法及其应用,将ACE在去离子水中稀释成最终浓度从0.5mU/L到60mU/L,每个96孔板中含有ACE 25μL、5μM的Cys‑Ang(I)‑Cys肽40μL,在37℃下孵育,然后在96孔板中加入50μL的AuNPs,通过检测Cys‑Ang(I)‑Cys肽的残留量来放大ACE活性信号,最后在5min内记录AuNPs溶液在400‑800nm范围内的紫外可见吸收光谱。本发明设计了一种基于血管紧张素I的Cys‑Ang(I)‑Cys肽,Cys‑Ang(I)‑Cys肽每一端都连接一个半胱氨酸(Cys),Cys‑Ang(I)‑Cys肽可以通过Au‑S键聚集在两端AuNPs的表面,并刺激AuNPs的聚集呈现紫色或蓝色,ACE引入后Cys‑Ang(I)‑Cys肽被水解,巯基从肽的一端解离,导致AuNPs分散,呈现红色,通过实现ACE催化肽的水解以及肽介导的AuNPs组装/分解,以一种快速、直接的方式进行ACE检测,以及运行该方法进行ACE抑制剂或抑制肽的筛选。
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