本发明公开了一种与食道癌驱动基因突变相关的抗原肽，食道癌驱动基因为EPCAM、MUC1、GPC3、LRP1B、ERBB4和PREX2中的至少两种；抗原肽的序列为SEQ No.1‑12中的至少两种；抗原肽的应用，为将抗原肽用于诱导产生特异性细胞毒性T细胞克隆；该抗原肽具有与DC细胞上MHC I分子高度的亲和力，并能有效地刺激、诱导产生特异性细胞毒性T淋巴细胞，可用于与食道癌相关驱动基因突变的肿瘤细胞的免疫清除，具备良好治疗潜力。