一种调节猪早期胚胎发育的营养物质的高通量筛选细胞模型及其构建与应用
摘要:
本发明公开一种调节猪早期胚胎发育的营养物质的高通量筛选细胞模型,所述高通量筛选细胞模型的构建方法为:(1)pGF‑promoter载体构建:将猪PCNA基因启动子克隆至pGF‑mCMV‑EF1‑Neo慢病毒载体中,获得pGF‑promoter载体;(2)转染HEK‑293T细胞:将pGF‑promoter载体和pMD2.g、psPAX2共转染HEK‑293T细胞,孵育,收集慢病毒上清液;(3)感染pTr细胞:用慢病毒感染pTr细胞;(4)G418筛选稳转株:用G418筛选培养基培养pTr细胞,最终获得pTr‑PCNA promoter‑Luciferase稳转细胞株,其命名为pTr‑luc。本发明所建立的营养物质调节猪早期胚胎发育的细胞模型可用于调节猪早期胚胎发育的营养物质的高通量筛选,对于快速筛选促进猪早期胚胎发育的营养物质具有重要意义。
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