本发明提供了一种基因修饰的牙髓干细胞及其制备方法和应用，属于脊髓损伤治疗技术领域，所述牙髓干细胞过表达骨桥蛋白、胰岛素样生长因子1和睫状神经营养因子；制备方法包括：1)将骨桥蛋白、胰岛素样生长因子1和睫状神经营养因子的基因克隆到穿梭质粒pUC57中，获得重组质粒pUC57‑Syn；2)将所述重组质粒pUC57‑Syn和骨架质粒pKAd5f11pES‑PmeI分别酶切、Gibson组装后的组装产物电转染细胞后获得重组腺病毒Ad‑OIC；3)将所述重组腺病毒Ad‑OIC感染牙髓干细胞获得基因修饰的牙髓干细胞。本发明提供的基因修饰的牙髓干细胞能够改善脊髓损伤炎症微环境，达到治疗脊髓损伤的效果。