本发明公开了一种机械定位机构及AGV小车，所述定位机构包括机架，升降组件及浮动定位组件,浮动定位组件包括悬臂支架，浮动座及导向杆，悬臂支架悬挂在升降组件上随升降组件升降，并相对升降组件可左右转动，浮动座安装在悬臂支架上并相对悬臂支架可前后转动，导向杆凸设在浮动座上并相对浮动座可上下移动；所述悬臂支架上还设置有上升定位检测元件、前后定位检测元件及左右定位检测元件来检测导向杆的下压，前后、左右偏转信号并发至至AGV小车的控制系统，以调整AGV小车车体的位置而实现精确定位。本发明采用机械结构提升AGV小车的定位精度，且不受环境影响，定位稳定可靠。