本发明属于医疗器械领域，涉及一种高性能再生性角膜材料与其制备方法及用途。制备方法包括：将在无菌条件下切取的新鲜动物或人眼球的角膜片依次进行初步轻度脱细胞、洗除脱细胞剂、补充糖胺聚糖交联、后续多次彻底脱细胞、再次洗除净脱细胞剂、保存液封存、灭菌。本发明的多次脱细胞技术与高效促愈合材料协同改性关键技术，制备出的高性能再生性角膜材料透明度高、力学性能好、具有良好的抗降解性和生物相容性且能促进角膜伤口愈合，是角膜材料制备技术的重大突破。同时，本发明工艺简单灵活，产品重现性好，易实现产业化推广。本发明的再生性角膜材料可广泛用于治疗因角膜病变或角膜损伤引起的盲性眼疾。