本发明公开了一种凹陷空心聚苯乙烯纳米颗粒的制备方法,在搅拌条件下，使苯乙烯分散于溶剂中，加入小分子醇，形成均一透明的混合液；将复合引发剂加入上述混合液形成初始反应液，初始反应液进行无皂乳液聚合；于反应过程中取不同反应时间的反应液，用含有与初始反应液浓度相同的复合引发剂的小分子醇水溶液进行稀释，继续搅拌反应完毕，经分离净化后可得目标产物。本发明制备的产品可被广泛用于药物、基因传输载体、疫苗佐剂、癌症诊断与治疗等方面。与现有技术相比，本发明用一锅法制得粒径均匀的凹陷聚苯乙烯纳米颗粒，方法简单，产品可批量制备，反应过程中无需使用稳定剂，合成工艺过程环境友好。