本发明公开了一种RNA放大检测方法及检测试剂盒，属于生物技术方法领域。检测方法包括RNA试样制备，向RNA试样中加入核酸提取液进行核酸提取获得待测样品RNA，向待测样品RNA中分步加入第一步反应液、酶液和第二步反应液等步骤，即可定量或定性检测待测样品RNA，还公开了用于RNA定量和定性检测的RNA放大检测试剂盒。本发明提供的方法和试剂盒具有体系兼容性好、扩增效率高、检测灵敏度高、准确度高、检测速度快的优点，适用于临床检验、血液筛查、食品安全检查及环境监测等领域中的核酸检验。