本发明公开了一种分泌抗Aβ1‑42单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用，该杂交瘤细胞株包括杂交瘤细胞株2A8和杂交瘤细胞株3F6，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO:C202060和CCTCC NO:C202061。本发明还公开了一种由分泌抗Aβ1‑42单克隆抗体的杂交瘤细胞株所分泌的特异性识别脑脊液或血液中Aβ1‑42多肽的单克隆抗体及其应用。本发明通过获得针对Aβ1‑42多肽不同抗原表位的单克隆抗体2种，特异性强且灵敏度高，可通过配对检测脑脊液或血液中的Aβ1‑42多肽的含量，应用于检测Aβ1‑42多肽含量变化或诊断以Aβ1‑42多肽异常表达为表征的疾病的产品的应用。