本发明涉及细菌检测技术领域，具体地说，涉及一种细菌耐药性产生实时观测系统。其包括培养基模具、检测相机和分析电脑，培养基模具的顶部开设培养槽，培养基模具的一侧外壁对应培养槽处等间距设置有位置标识槽，培养基模具的另一侧外壁对应培养槽处等间距设置有浓度标识槽。该细菌耐药性产生实时观测系统中，在培养基模具上开设相邻的培养槽，培养槽内抗生素浓度为梯度分布，能够体现细菌对抗生素的适应性，进而有效观测到细菌实际耐药性产生的过程，采用检测相机实时拍摄并记录细菌在不同浓度抗生素培养基中生长状况，对细菌耐药性产生的过程进行记录，可直观的观测和记录细菌耐药性产生的过程。