本发明提供一种灵芝的组培方法,具体涉及食用菌组织培养技术领域。本发明突破性地以灵芝子实体组织中的多酚氧化酶为关注对象，在切取外植体前先用生物消毒液降低子实体中多酚氧化酶活性，防止其产生褐变，再于获取外植体后采用保鲜液冷藏和活化激活外植体中的纤维素酶和多酚酶，促进外植体接种后迅速生长出菌丝，并在培养期间采用特定波长的红光和绿光交替、间歇照射，之后用微波照射试炼，刺激菌丝体的生长和其中有效成分的富集。本发明的外植体成活率为72％以上，获得的菌丝体生长速度为8mm/d，总氨基酸含量为16％以上、多糖含量4％以上。