本发明公开了一种草地贪夜蛾幼期全暗条件室内人工扩繁方法。将草地贪夜蛾成虫按照雌雄比约1:1的比例饲养在透明养虫罐中，罐底放入少许纱布收集草地贪夜蛾卵。每日将纱布上新收集到的草地贪夜蛾卵块剪下，放入孵化盆中孵化。孵化盆中草地贪夜蛾幼虫生长至三龄后，采用玻璃培养皿进行分装，每个培养皿内放入三龄幼虫和少许人工饲料，连续饲养，直至草地贪夜蛾幼虫化蛹。后期收集培养皿内的蛹，放入塑料盒内直至羽化。草地贪夜蛾卵期、幼虫期、蛹期的饲养条件为温度25±0.5℃、相对湿度65±5％、光周期L:D＝0h:24h。本发明公开的草地贪夜蛾饲养方法简单，能满足室内生测试验对草地贪夜蛾各虫态的需求。