本发明公开了一种稳定同位素标记的喹噁啉‑2‑羧酸及其合成制备方法，包括如下步骤：S1：将在酸催化下的丙酮醛‑1‑肟，与稳定同位素标记的苯胺发生缩合反应后，加入三氯氧磷，反应得到稳定同位素标记的2‑甲基喹噁啉；S2：将所述步骤S1得到的稳定同位素标记的2‑甲基喹噁啉由二氧化硒和双氧水进行氧化，再进行后处理纯化，即得到稳定同位素标记的喹噁啉‑2‑羧酸。本发明提供的稳定同位素标记的喹噁啉‑2‑羧酸的合成方法，制得的喹噁啉‑2‑羧酸质量好，纯度在98％以上，同位素丰度在99％以上；原料易得且廉价，合成成本低，步骤少，操作简单快捷；得到的目标化合物可以作为检测喹乙醇类和卡巴氧类兽药残留的内标物使用，大大降低了检测成本。