本发明提供了一种宠物用生物除臭喷剂及其制备方法和应用。本发明宠物用生物除臭喷剂的主要原料包括：微生态制剂，以及植物提取物；其中，所述微生态制剂包括：枯草芽孢杆菌菌液，地衣芽孢杆菌菌液，凝结芽孢杆菌菌液，嗜酸乳杆菌菌液，粪肠球菌菌液，以及酿酒酵母菌液中的一种或几种；所述植物提取物包括：丝兰提取物，芦荟提取物，藿香提取物，金银花提取物，银杏叶提取物，以及茶多酚中的一种或几种。本发明除臭喷剂安全、绿色、无毒、无残留、有发酵芳香，不会二次污染环境，同时，通过微生态制剂和植物提取物的共同作用，能够有效的减少排泄物的臭味、净化空气，同时也能够清除宠物毛发异味。