本发明公开了蚕丝蛋白创伤敷料及其制备方法和应用，所述敷料为丝蛋白纤维支架网络与丝胶蛋白水凝胶网络互穿的双网络结构；所述丝蛋白纤维支架为丝素与丝胶的组合物，或丝胶纤维支架，所述水凝胶为丝胶蛋白水凝胶。本发明所述蚕丝蛋白创伤敷料具有多孔结构，透气性好；具有很好的机械强度，便于手术缝合；具有高生物相容性；能有效促进皮肤创伤愈合，可作为皮肤组织创伤修复；所述丝胶蛋白创伤敷料具有良好的生物相容性和细胞粘附性，可长期支持细胞的存活、增殖与迁移；该创伤敷料可以负载药物和生长因子等作为递送载体；该敷料也是一种三维多孔的丝胶蛋白生物支架，可用于细胞外基质支持细胞生长和促进营养物质交换，可应用于多种组织损伤的修复和疾病的治疗。