本发明属于微生物动物病毒领域，具体涉及一种番鸭C亚型禽偏肺病毒弱毒株及其制备和应用。本发明的番鸭C亚型禽偏肺病毒弱毒株，保藏号为：CCTCC NO:V201823，核苷酸序列为SEQ ID NO：1，氨基酸序列为SEQ ID NO：2至SEQ ID NO：9。本发明的番鸭C亚型禽偏肺病毒弱毒株，通过将C亚型禽偏肺病毒S‑01株进行传代培养至50代制得。本发明首次获得番鸭C亚型禽偏肺病毒S‑01株致弱培养株，为弱毒苗的研制打下基础。