本发明公开了一种分泌硝呋索尔残留标志物单克隆抗体的杂交瘤细胞株，属于食品安全免疫检测领域。所述杂交瘤细胞株的保藏编号为：CGMCC No.14698，是将BALB/c小鼠用完全弗氏佐剂进行首次免疫，不完全弗氏佐剂进行4次加强免疫，不含佐剂的硝呋索尔残留标志物完全抗原进行1次冲击免疫，使得BALB/c小鼠获得免疫；将高效价低IC50的获得免疫的小鼠脾细胞通过PEG方法与小鼠骨髓瘤细胞融合，经过间接竞争ELISA筛选和三次亚克隆，得到的细胞株。此细胞株分泌的单克隆抗体，对硝呋索尔残留标志物具有较好的特异性和检测灵敏度(IC50值为2μg/L)可以用于食品中硝呋索尔残留标志物的残留检测。