本发明公开了一种表达卵形疟原虫AMA1蛋白的病毒疫苗的制备方法，属于病毒学和基因工程技术领域。本发明将表达卵形疟原虫顶端膜蛋白‑1的基因插入到水疱性口炎病毒VSV基因组载体中，构建重组病毒载体骨架质粒XN2‑AMA1，用含T7RNA聚合酶的痘病毒感染乳仓鼠肾细胞(BHK‑21)后，将质粒XN2‑AMA1及结构蛋白质粒pN、pP、pL共转染BHK‑21细胞，在细胞内实现重组病毒的拯救，包装出表达AMA1的类病毒颗粒，形成重组病毒rVSV‑AMA1即为本发明疫苗。本发明疫苗操作简单、产生滴度高、免疫周期短、可诱导强烈的体液及细胞免疫应答，有可应用于临床使用的巨大潜能。