本发明提供了一种快速判定烟草种子采收时间的方法。本发明提供的方法包括种子剥取、粗酶液提取、总过氧化物歧化酶活性测定和判定等步骤。当总过氧化物歧化酶的测定值低于极限数值时，则判定可以进行采收，YY-87和MSK-326种子中总过氧化物歧化酶的极限数值分别为75U/mg prot和90U/mg prot。本发明提供的方法条件选择合理，检测数据准确可靠，耗时短，能够在半天内完成所有检测步骤。弥补了现有的通过萌发率来判断烟草种子采收时间的方法所需时间过长的缺点，满足了烟草生产过程中的质量控制要求。