本发明涉及一种钙离子和锌离子双通道罗丹明类荧光探针及其制备方法和应用，其结构式为：制备方法：将罗丹明B与水合肼，反应得到罗丹明B酰肼；将对氨基苯甲酸甲酯和水合肼反应，得到的产物溶于溶剂中，滴加水杨醛，反应得到水杨醛‑4‑氨基苯甲酰肼腙；将三聚氯氰溶于溶剂中，加入缚酸剂，在冰水浴，氮气保护下，滴加罗丹明B酰肼的THF溶液，搅拌得到RSH；将RSH溶解，加入缚酸剂，氮气保护下，滴加水杨醛‑4‑氨基苯甲酰肼腙，反应得到RSHT；将RSHT溶解，加入缚酸剂，N2保护下滴加水合肼，反应即得。本发明的荧光探针化合物对锌离子和钙离子有很好的选择性，并且应用于在环境应用中不仅方便而且具有较好的使用效果。