本发明涉及一种高效液相色谱法检测阿卡波糖的方法，采用如下色谱条件：色谱柱：XBridge Amide柱(waters，4.6mm×250mm，3.5μm)；流动相：有机相‑水相；流速：1.0‑1.4mL/min；检测波长：210nm；柱温：60‑70℃；进样量：10‑20μL；检测器采用紫外检测器；所述流动相中有机相‑水相的体积比为75：25‑80：20；所述流动相中的有机相为乙腈，所述流动相中含有乙酸铵，乙酸铵浓度范围为5‑10mM，pH范围为5.0‑10.0。与现有方法相比，可以实现阿卡波糖与杂质A的完全分离，并可以多分离出一种未知杂质，更好地控制阿卡波糖的产品质量。