本发明属于电化学生物燃料电池领域，公开了一种基于石墨烯的生物燃料电池酶修饰阳极及制备与应用。所述制备方法为：对基底电极进行表面预处理；将预处理后的基底电极置于石墨烯溶液中，用循环伏安扫描法进行电化学聚合，得到GN修饰电极；将GN修饰电极置于含有吡咯、高氯酸锂和碳酸氢钠的水溶液中，用恒电位法进行电化学聚合，修饰一层聚吡咯；将含有壳聚糖、乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶的复合酶溶液滴加到上述电极表面，晾干后得到具有酶层的修饰电极；再将其置于戊二醛溶液中浸泡交联，得到基于石墨烯的生物燃料电池酶修饰阳极。本发明的电极成本低廉、催化性能好、适用底物范围广，具有良好的应用前景。