本发明公开了一种马铃薯脱毒原原种土壤培养方法，包括步骤：1)组培苗生产，2)生根壮苗，3)土壤培养，4)收获和贮藏，所述的步骤2)生根壮苗是将适于定植的组培苗从培养瓶中取出，去掉根系并洗净培养基后，采用NAA50mg/L+2‑4D 5mg/L生根剂浸根10～15分钟，然后定植于无土培养基质中，同时用塑料弓棚进行保温保湿，促进组培苗生根发苗和快速生长；在定植12天后开始浇施营养液，每隔5天浇施一次，共浇施3次；在定植29～32天后揭开弓棚塑料，选择苗高达10cm、叶片大于1cm的健壮组培苗移栽于预处理的大田土壤中。本发明采用土壤代替基质培养马铃薯脱毒原原种，大大降低了生产成本，使得市场供应价格下降，对脱毒马铃薯的推广和普及有积极作用。