本发明公开了一种蚜虫共生菌多重PCR检测的引物组，该引物组是由检测沃尔巴克氏菌(Wolbachia pipientis)、杀雄菌属(Arsenophonus)和蚜虫U型共生菌(Regiella insecticola)的引物对组成。本发明还公开了一种蚜虫共生菌多重PCR检测的方法，该方法是将上述的引物组与待测蚜虫样品的总DNA进行多重PCR反应，反应结束后对PCR反应产物进行电泳分析，以确定蚜虫样品中是否含有蚜虫共生菌。本发明检测方法快速、准确、灵敏度高，能够在一个PCR反应中同时鉴定蚜虫样品中三种蚜虫共生菌的感染情况，大大降低了工作量，提升了工作效率，节省了一定程度的检测费用。