本发明提供了一种基于金磁微粒的吖啶酯化学发光免疫学检测人附睾分泌蛋白4(HE4)的方法，主要包括以下步骤：(1)以金磁微粒作为免疫反应和固相分离的载体，将HE4包被抗体偶联在金磁微粒的表面；(2)用封闭液封闭金磁微粒表面未与HE4包被抗体结合的空白位点；(3)用吖啶酯(AE)对HE4标记抗体进行标记；(4)将待检样品和能与HE4抗原发生特异性结合吖啶酯标记的HE4抗体加入封闭后的包被有HE4抗体的金磁微粒中进行反应，形成双抗体夹心复合物；(5)清洗；(6)化学发光检测。本发明检测灵敏度高、特异性好、线性范围宽、精密度高、稳定性好、无放射性污染、操作安全、方法简便快速。