灵芝三萜酸提取分离工艺方法。本发明涉及一种灵芝提取分离工艺方法，包括如下步骤：(1)先将灵芝发酵菌丝体或灵芝子实体粉碎后萃取，将萃取液合并，超声处理；然后过滤分离；(2)过滤分离后得到滤液α和滤渣；将滤渣加入NaHCO3溶液，超声处理，过滤得到滤液β；接着将滤液α和滤液β合并，分散得上清液；将上清液酸化得到酸化液；(3)将酸化液用等体积的氯仿提取液萃取后，收集并合并萃取液，将萃取液静置，过滤，得到黄色清液；(4)将黄色清液减压蒸干得到黄色粘稠液体，干燥烘干至恒重。本发明所得到的灵芝三萜酸纯度高，且提取分离时间短，有效提取率高，有机溶剂的消耗较少，不造成二次污染，提取分离工艺操作简便、成本经济，能够应用于大规模工业化生产。