本发明公开了一种幼苗期鉴定烟草青枯病抗性的方法，将保水剂与珍珠岩按2：1的比例混均，消毒后装入6孔细胞培养板，将烟草种子播种在细胞培养板上，每个品种各播种到一个孔中，10～20粒/孔，放在无菌培养室中培养，温度环境25℃、每天光照16小时、光照强度4000lux、相对湿度70～80%，出苗后，每个孔中均匀的留苗5株，用烟草育苗专用肥配制营养液，使其中氮肥浓度达到100ppm，追施到培养板中，待小苗长至两片真叶时，将青枯菌悬浮液用移液枪接种到细胞培养板的每个孔中，每孔接种1ml，15天后调查记录。本发明鉴定周期更短，25天小苗即可用于鉴定，不受季节限制，试验稳定性强。