发明公开
- 专利标题: T-DNA及其插入位点右臂侧翼基因组序列的扩增引物和鉴定方法
- 专利标题(英): T-DNA as well as amplification primer and identification method of insertion site right-arm flanking genome sequence of T-DNA
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申请号: CN201410336970.9申请日: 2014-07-16
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公开(公告)号: CN104152442A公开(公告)日: 2014-11-19
- 发明人: 梁慎 , 徐小利 , 赵卫星 , 常高正 , 李晓慧 , 程丹丹
- 申请人: 河南省农业科学院园艺研究所
- 申请人地址: 河南省郑州市金水区花园路116号
- 专利权人: 河南省农业科学院园艺研究所
- 当前专利权人: 河南省农业科学院园艺研究所
- 当前专利权人地址: 河南省郑州市金水区花园路116号
- 代理机构: 河南科技通律师事务所
- 代理商 樊羿
- 主分类号: C12N15/11
- IPC分类号: C12N15/11 ; C12N15/84 ; C12N15/66 ; C12Q1/68
摘要:
本发明涉及一种T-DNA及其真菌插入位点右臂侧翼基因组序列的扩增引物和鉴定方法。本发明T-DNA包括左臂、右臂DNA,以及二者之间的多克隆位点和eGFP基因,且该T-DNA具有SEQIDNO.9所示的核苷酸序列,本发明公开了其载体及构建方法;该T-DNA的真菌插入位点右臂侧翼基因组序列的巢式PCR扩增的上游引物对应于eGFP基因的左端序列,下游引物对应于右臂的左端序列;该右臂侧翼基因组序列的鉴定方法包括基因组DNA提取、酶切处理、纯化处理、连接反应、巢式PCR扩增及其产物鉴定、克隆和测序等步骤。本发明引物特异性强,能够快速、准确、高效、稳定、普适性地扩增出T-DNA的右臂侧翼基因组DNA序列,大大提高鉴定效率。
公开/授权文献
- CN104152442B T‑DNA及其插入位点右臂侧翼基因组序列的扩增引物和鉴定方法 公开/授权日:2017-04-05
IPC分类: