本发明公开了一种发酵生产β?胡萝卜素用的改良玉米浆及其制备方法和应用。该改良玉米浆是将玉米浆原料与Na2S混合后充分反应后离心，上清液调pH=6.3?6.7而得。本发明通过物理和化学手段预处理玉米浆，最终得到三孢布拉氏霉正菌ATCC 14271（+）和三孢布拉氏霉负菌ATCC 14272（?）可以充分利用的原料，利用本发明的改良玉米浆为原料发酵可获得较高的β?胡萝卜素得率，干菌丝体中β?胡萝卜素含量：2%?6%（W/W）。