本发明公开一种叶酸和TAT肽共修饰的载药脂质体及其制备方法，该载药脂质体包括脂质体、长链靶向膜材、短链靶向膜材和药物。同时本发明提供了该叶酸和TAT肽共修饰的载药脂质体的制备方法，该方法包括如下步骤：称取磷脂、胆固醇、长链靶向膜材、短链靶向膜材及药物，用有机溶剂溶解，随后在50℃条件下减压旋干有机溶剂，得到含药脂膜;向含药脂膜中加入磷酸盐缓冲溶液中溶解，超声2分钟，用0.22 μm膜，过滤10次，得到双靶载药脂质体。本发明借助不同重均分子量的PEG连接TAT肽与特异性配体，构建双配体修饰的纳米载体，制得的载药脂质体可实现高效的药物肿瘤细胞内输送。