本发明提供了一种用于从进料混合物中回收多不饱和脂肪酸（PUFA）产物的色谱分离方法，该方法包括将进料混合物引入到具有多个连接的色谱柱的模拟或真实的移动床色谱设备中，所述模拟或真实的移动床色谱设备含有作为洗脱液的含水有机溶剂；其中，该设备具有包括至少第一区域和第二区域的多个区域，每个区域均具有提取物流和提余物流，可以从所述多个连接的色谱柱收集来自所述提取物流和提余物流的液体；并且其中，（a）从所述第一区域中的柱子中收集含有所述PUFA产物和极性较大的组分的提余物流，并且将所述提余物流引入到所述第二区域中的不相邻的柱子中，和/或（b）从所述第二区域中的柱子中收集含有所述PUFA产物和极性较小的组分的提取物流，并且将所述提取物流引入到所述第一区域中的不相邻的柱子中；将所述PUFA产物在每个区域中与所述进料混合物的不同组分分离开，并且其中，所述含水有机溶剂不是水性醇。