一种NAD激酶变体基因及其用途，利用易错PCR技术对NAD激酶基因进行随机突变，通过筛选获得NAD激酶变体基因，该基因中编码第43位的原脯氨酸的密码子突变为丙氨酸的密码子，第182位的原丝氨酸的密码子突变为精氨酸的密码子，该变体基因核苷酸序列为SEQIDNo.1，可编码NAD激酶变体酶。本发明创造了对NAD+有较高催化活性的NAD激酶变体酶，能催化NAD+生成辅酶NADP+。与NAD激酶相比较，NAD激酶变体酶在测定的一例中活性提高了1-1.5倍,为生物转化生产辅酶NADP+提供了广阔的应用前景。