一种基于PCR的SNP分型方法及应用
摘要:
本发明提供了一种基于PCR的SNP分型方法及应用,其步骤是:(1)选择用于实验的植物样品——某一物种多个品系的组织;(2)提取组织的基因组DNA;(3)将基因组DNA纯化后作为PCR扩增的模板;(4)在该物种的SNP数据库挑选AT类型的SNP;(5)筛选出SNP位点前面第三个碱基是G的SNP;(6)用primer3软件设计引物,使正向引物的最后一个碱基位于SNP位点,而且最后一个碱基为T;(7)引入错配,将正向引物的倒数第三个碱基变为A;(8)进行PCR扩增;(9)将PCR产物在变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离;(10)观察扩增条带的有无。一种基于PCR的SNP分型方法在油菜聚合育种的应用,方法易行,提供简便,成本低,检测简便,效率高,SNP的分型成功率达到91%。
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