本发明公开了细胞粘附分子5（ICAM5）单克隆抗体、制备方法及应用，其杂交瘤细胞株保藏编号为CGMCC No.5798。本发明提供ICAM5单克隆抗体，可用于针对ICAM5抗原的免疫荧光和蛋白印迹（Western blotting）等科学研究，经试验验证在人及小鼠神经细胞表面有很高的表达并且表达稳定。抗体特异性强，并且效价高，ELISA检测效价可达1：400000，因此试验中ICAM5抗体使用浓度较低，抗体用量少。ICAM5抗原位于神经细胞胞体及神经纤维表面，因此免疫荧光染色可清晰展示神经细胞胞体及神经纤维结构。