本发明涉及鸭病毒性肝炎活疫苗用耐热保护剂及其制备方法和应用，将冻干保护剂基质按一定的比例混合、配制，将保护剂分别进行无菌处理，对可以进行高压灭菌的保护剂组份溶于双蒸水中，108～121℃灭菌15～30分钟；将不耐高压灭菌的保护剂组份按配比溶于双蒸水中用0.22μm的滤膜除菌，再将两者混合成为耐热保护剂，然后将该耐热保护剂和鸭病毒性肝炎病毒液进行1∶1～1.2混合，采用相应的冻干曲线冻干，与现有技术相比，本发明为鸭病毒性肝炎弱毒活疫苗的研制提供了很好的资源，克服国产疫苗保存工艺落后现状，在2～8℃条件下保存24个月，疫苗效价均保持在每羽份≥106.0EID50。