本发明公开了一种菌种保藏液和菌种保藏方法。该菌种保藏液以100mL溶液计含有酵母粉0.2g～0.6g、氯化钠0.4g～1.0g、二甲亚砜2mL～10mL、甘油10mL～30mL、其余为水。该菌种保藏方法是将待保藏菌种加入上述菌种保藏液中，混合均匀，得到待保藏菌液。用无菌滤纸吸取待保藏菌液，得到含菌滤纸；用无菌透明胶带将含菌滤纸固定在无菌蜡纸上，然后置于冰箱中保藏。本发明菌种保藏液可长时间维持微生物活力、保藏期较长。本发明的菌种保藏方法生物安全性和保存效能均较高，操作方便且转运方便，特别是当菌种数量时具有储存空间小且便于查找。