一种卷烟烟丝中四种色素（柠檬黄、苋菜红、胭脂红和日落黄）含量的测定方法，包括样品溶液的制备，液相色谱分析及测定结果的计算等步骤。经优化之后的检测方法具有检测时间短、操作简便、灵敏度高、回收率高及重复性好等优点，本发明方法的色谱条件使柠檬黄、苋菜红、胭脂红和日落黄的色谱峰与杂质色谱峰分离较好，并且具有较好的相关性，检测限在0.02~0.03μg/g之间，平均回收率分别为102.47％、92.48％、89.94%和96.66％，样品测试结果的平均相对标准偏差分别为3.18%、2.63％、2.74%和3.02％，说明本法的回收率较高，重复性较好。本发明为卷烟的质量监督提供了科学的依据。