本发明涉及一种H1N1型猪流感病毒疫苗株，其分类命名为猪甲型流感病毒A/Swine/Nanjing/50/2011(H1N1)，微生物保藏号为：CCTCC NO：V201218。本发明进行了H1N1猪流感病毒毒株的分离鉴定、全基因序列测定，并用H1N1猪流感病毒毒株制成预防猪流感的灭活疫苗。本发明毒株制备的H1N1猪流感病毒灭活疫苗对同源强毒攻毒的猪可以提供很好的保护，具有良好的免疫原性，不论单苗或联苗，均可有效预防H1N1型猪流感。