本发明涉及在目标细胞、组织或生物体中确定存在产生光子的生物标记物的方法。该方法基于不受发光约束的激发所产生的荧光（FUEL），并包括步骤：a）提供适于生物标记物通过发光产生至少一个第一光子的条件；b）提供置于接近所述细胞、组织或生物体的FUEL探针对上游（FPP-U），其中步骤a）的至少一个第一光子激发FPP-U，FPP-U发射至少一个第二光子。FPP-U可选自量子点、碳纳米管、荧光蛋白、金刚石纳米晶体和金属卟啉。该方法特征在于所述生物标记物和所述FPP-U不结合，以及特征在于至少一个第二光子的每个比至少一个第一光子的每个波长更长。