本发明公开了一种罗非鱼精子通用稀释液及制备方法，它由氯化钠、氯化钾、碳酸氢钠、氯化钙按一定比例制成，其制备步骤为A、精子稀释液母液的配制：(1)每毫升含氯化钠1mmol的母液的制备；(2)每毫升含氯化钾1mmol的母液的制备；(3)每毫升含氯化钙0.5mmol的母液的制备；(4)每毫升含碳酸氢钠0.5mmol的母液的制备；(5)上述母液均放置4℃冰箱保存；B、精子稀释液的配制：(1)用微量取样器从各组分母液中量取配制稀释液；(2)将上述各组分混合均匀；(3)配制好的稀释液放置4℃冰箱保存，备用。本发明配方合理，使用方便，适合各种罗非鱼品种精子的稀释，方法易行，操作简便，适合配制各种体积的稀释液，可确保所配制稀释液中个组分浓度的准确性。