本发明公开了一种以改性的环氧基树脂为载体的固定化酶，它包括酶和固定所述酶的改性载体，所述的酶为γ-谷氨酰转肽酶，所述的改性载体为经过pH8～10.5的载体两性电解质改性后的环氧基树脂Eupergit C250L。本发明还公开了上述固定化酶的制备方法和应用。本发明所得到的固定化酶具有性状均一、酶稳定性强、重复使用性能好、对反应环境pH值适应性强等特点，进一步提高了γ-谷氨酰转肽酶的稳定性，并实现了新型固定化酶在茶氨酸合成中的应用。