公开了与特异性结合反应有关的测定方法，其与已知方法相比更简单化。能够产生化学发光的化合物被固定在固体支持物上，作为用于捕获样品中分析物的特异性结合配对成员。可以激活所述化学发光化合物并且被结合于特异结合性配对成员的活化剂化合物被过量地与样品一起添加至所述固体支持物。在活化剂结合物已经特异性地结合的位点，引发剂溶液的添加引起化学发光反应。该测定方法被称为非分离式测定法，因为在检测步骤之前，不需要除去或者分离过量的检测标签(活化剂结合物)。该方法适用于多种类型的测定，包括免疫测定、受体-配体测定和核酸杂交测定。