本发明的胰岛素前体发酵过程的补料优化方法，基于微生物生长动力学基础，采用首先通过分批补加甲醇来确定最初甲醇流加速率，然后通过最终发酵菌体密度与实时测样菌体密度的差值以及发酵周期来进行比生长速率的计算和调整，最后计算出实时待调整的甲醇流加速率的方法，实现了根据菌体生长状况及时调整实时甲醇流加速率的变比生长速率控制，将比生长速率与菌体生长、产物表达进行参数相关，这种变比生长速率调控策略能够及时地调整菌体的生长，使之与产物表达相协调，可以明显地提高蛋白的浓度，重组猪胰岛素前体的浓度和总产量较现有技术(Invitrogen酵母发酵手册)酵母发酵的方法提高了50％。